Penelitian ini memilih L-isoleucine auxotrophic Corynebacterium glutamicum strain FA-1 untuk mengeksplorasi transaminase yang mempengaruhi sintesisL-leusin dan L-valin. Penelitian tersebut pertama kali melumpuhkan gen ilvE, dan menemukan bahwa setelah gen ilvE tersingkir, aktivitas sintesis L-valin hilang, tetapi masih ada kemampuan sintesis L-leusin yang lemah. Ini menunjukkan bahwa ada aminotransferase lain yang mengkatalisis sintesis L-leusin. Selanjutnya, gen aspB terus tersingkir, dan kemampuan untuk mensintesis L-leusin benar-benar hilang. Atas dasar knocking out ilvE, overekspresi gen aspB memulihkan sintesis L-leusin sampai batas tertentu (Tabel 1). Hasil ini menunjukkan bahwa protein yang dikode oleh aspB memiliki aktivitas sintesis L-leusin.
Selanjutnya, penelitian ini menyaring beberapa gen aminotransferase endogen dan eksogen, dan mengekspresikan gen aminotransferase ini dalam strain co-knockout ilvE dan aspB untuk mengeksplorasi apakah aminotransferase ini memiliki aktivitas sintesis asam amino rantai cabang. Di antara mereka, TyrB menunjukkan aktivitas sintesis L-leusin spesifik, sementara YbgE dan CallvE menunjukkan aktivitas sintesis ganda L-leusin dan L-valin. Hasil ini menunjukkan bahwa optimasi transaminase untuk mengganti spesifisitas substrat memiliki potensi besar untuk meningkatkan hasil asam amino rantai cabang.
